简单来说，缓冲溶液就是一种”稳pH”的溶液——当少量酸或碱加入时，它的pH变化很小。这就像水中加了”减震器”，能够吸收pH的波动。
缓冲溶液通常由一对”弱酸和它的盐”或”弱碱和它的盐”组成。例如，醋酸-醋酸钠是最经典的缓冲对之一。当有酸加入时，缓冲对中的碱性成分会中和它；反之亦然。缓冲溶液的有效缓冲范围是pKa±1。
PBS（磷酸盐缓冲液）：pH 7.2-7.4，生物实验中最常用，适合细胞培养和免疫实验。优点是生物相容性好，缺点是会影响某些含磷酸基团的实验。
Tris-HCl：pH 7.0-9.0，分子生物学实验的标配，广泛用于DNA/RNA实验和蛋白电泳。注意Tris的pKa受温度影响较大，25℃时pKa为8.1，4℃时会升高约0.3个单位。
HEPES：pH 6.8-8.2，细胞培养中常用于替代碳酸盐缓冲体系。温度对其pH影响小，是Good’s缓冲液之一。
醋酸钠缓冲液：pH 3.6-5.6，适合酸性条件下的实验，如蛋白质结晶、某些酶反应。
所需试剂：氯化钠（NaCl）8.0g、磷酸氢二钠（Na₂HPO₄）1.44g、磷酸二氢钾（KH₂PO₄）0.24g、氯化钾（KCl）0.20g、去离子水适量。
配制步骤：先将上述试剂称量好，加入约800ml去离子水中搅拌溶解；用pH计测定pH值，用HCl或NaOH调至7.4；定容至1000ml；灭菌后即可使用。
错误一：直接定容到1L再调pH。 应先在约80%的体积中溶解并调好pH，最后再定容。因为加水会稍微改变pH，但影响很小，且在缓冲范围内可以接受。
错误二：用试纸代替pH计。 试纸精度不够（通常只能精确到0.5个pH单位），配制缓冲液时建议使用校准过的pH计。
错误三：忽略温度影响。 Tris缓冲液的pH受温度影响显著。如果实验在4℃进行，应在4℃条件下调pH，或者在室温下调低约0.3个pH单位。
错误四：使用不合适纯度的试剂。 缓冲液配制建议使用分析纯及以上等级的试剂，确保杂质不干扰实验。
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步骤 |
操作 |
检查点 |
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1 |
确认缓冲体系和pH |
是否适合实验要求 |
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2 |
称量试剂 |
纯度等级是否正确 |
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3 |
溶解于80%体积水中 |
充分溶解 |
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4 |
pH计校准并调pH |
pH计是否校准 |
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5 |
定容 |
容量瓶准确定容 |
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6 |
灭菌（如需） |
高压灭菌或过滤 |
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7 |
标注并储存 |
日期、浓度、pH |
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